中文名稱: 親和純化抗體洗脫濃縮試劑盒
英文名稱: Affinity purified antibody eluent & concentration kit
相關(guān)類別: 抗體相關(guān)支持試劑
儲(chǔ) 存:冷藏(2-8℃)
概述
親和純化抗體洗脫試劑盒主要應(yīng)用于純化后的抗體分離,包括瓊脂糖凝膠,Protein A和Protein G親和純化。
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特點(diǎn)
使用說明
1. 將偶聯(lián)好抗原或抗體的填料或瓊脂糖凝膠放入5-10 ml純化柱中,棄去保存液。
2. 純化柱中加入10 ml預(yù)洗脫液洗脫一次,棄去流穿液。
3. 純化柱中加入10 ml洗脫液,得到的流穿液即為抗體。棄去前3 ml流穿液,后面7 ml分成7管,每管接1 ml流穿液,抗體收集管中預(yù)先加入50 ul收集液。
4. ELISA檢測(cè)7管抗體的效價(jià),保留效價(jià)最高的2-3 ml抗體。
5. 效價(jià)較低的抗體可以進(jìn)行濃縮。將保留的抗體加入超濾管中,4℃離心,水平離心機(jī)轉(zhuǎn)速4000 g,如果是角轉(zhuǎn)離心機(jī)轉(zhuǎn)速5000 g,離心15-60 min。時(shí)間需根據(jù)超濾管中甩下的液體來控制,濾膜以上和以下液體的體積比可估算濃縮的倍數(shù)。
6. 濾膜以上液體即為抗體,為了更多的收集抗體,離心后直接將超濾管垂直放入超聲清洗器中,超聲20 min。如果沒有超聲清洗器,可以用移液器吹打?yàn)V膜以上液體。
7. 抗體長(zhǎng)期保存可加入40%甘油和0.05%疊氮鈉,-20℃~-80℃保存。
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