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CHO/dhFr-[CHO-DXB11]倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 : 紀(jì)寧生物
中文名稱(chēng) : 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(二氫葉酸還原酶缺陷)
細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng) : CH O /dhFr-[CH O -D XB11]
細(xì)胞形態(tài) : 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 : 貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 : 空氣,95% ;CO2,5% 37℃
凍存條件 : 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 : IM DM (PM 150510)+10%FBS(164210-50)+H A T 添加劑(PB180631)+1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm /min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 : 1~ 2分鐘換液頻次 2~ 3次/周
細(xì)胞背景描述
C H O /dhFr-細(xì)胞為二氫葉酸還原酶缺陷細(xì)胞。在沒(méi)有H T(次黃嘌呤-胸腺嘧啶)時(shí),C H O /dhFr-細(xì)胞會(huì)死亡;C H O /dhFr-細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基中加氨甲喋呤,可以防止對(duì)藥物低抗性的回變細(xì)胞的生長(zhǎng)。
供體年齡 : 雌性,成年
組織來(lái)源 : 正常卵巢
細(xì)胞類(lèi)型 : 自發(fā)永生化細(xì)胞
生物安全等級(jí) : 1
CHO/dhFr-[CHO-DXB11]倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞
收到常溫細(xì)胞后如何處理保存
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照紀(jì)寧生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
C H O /dhFr-細(xì)胞為二氫葉酸還原酶缺陷細(xì)胞。在沒(méi)有H T(次黃嘌呤-胸腺嘧啶)時(shí),C H O /dhFr-細(xì)胞會(huì)死亡;C H O /dhFr-細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基中加氨甲喋呤,可以防止對(duì)藥物低抗性的回變細(xì)胞的生長(zhǎng)。
供體年齡 : 雌性,成年
組織來(lái)源 : 正常卵巢
細(xì)胞類(lèi)型 : 自發(fā)永生化細(xì)胞
生物安全等級(jí) : 1