人外周血淋巴細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品名稱 : 人外周血淋巴細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 : 紀(jì)寧生物
組織來源 : 血液組織
產(chǎn)品規(guī)格 : 5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡介
人外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞分離自外周血。外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中首次提出外周血這一新概念。
內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,亦稱為成血管細(xì)胞(Angioblast) ,是一群具有游走特性,能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞,缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型,不能形成管腔樣結(jié)構(gòu),其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。研究顯示,內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,E PC s生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點(diǎn)。
方法簡介
紀(jì)寧生物實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血淋巴細(xì)胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶 。
質(zhì)量檢測
紀(jì)寧生物實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血淋巴細(xì)胞經(jīng)過檢測,純度可達(dá)90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 懸浮
細(xì)胞形態(tài) : 圓形
傳代特性 : 不增殖;不傳代
傳代比例 : 不傳代
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
人外周血淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用紀(jì)寧生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片
使用方法
人外周血淋巴細(xì)胞是一種懸浮細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈圓形,在紀(jì)寧生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞不增殖;不傳代;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作
1.取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.懸浮細(xì)胞處理
1) 收集T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中,用PBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶1-2次,收集清洗液;
2) 1200-1500rpm 離心3min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀。
3)加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細(xì)胞;將分散好的細(xì)胞調(diào)整合適
密度接種至培養(yǎng)器皿中,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4)若遇到懸浮細(xì)胞團(tuán)塊較大,無法機(jī)械吹散時,向步驟2)中細(xì)胞沉淀添加0.25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中,用吸-管輕輕吹打混勻,37℃溫浴2-3min,消化結(jié)束后,加入胰酶抑制劑(或血清)終止消化,用吸管輕輕吹打,分散細(xì)胞;1200rpm 離心5min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀。
5)加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻;按傳代比例進(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充
新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
6)待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
人外周血淋巴細(xì)胞
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和紀(jì)寧生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。